液相色谱柱是HPLC系统的核心部件,其选择和维护直接影响分离效果、数据重复性和仪器使用寿命。本文从固定相类型、粒径、柱长等参数出发,系统讲解色谱柱的选型原则和维护技巧。

一、色谱柱选型要点

固定相类型:C18(十八烷基)是最常用的反相固定相,适合分析中等极性化合物;C8极性强于C18,适合极性较大的分析物;氨基柱、氰基柱适用于糖类、核苷酸等极性化合物;正相硅胶柱适合脂溶性异构体分离。

粒径选择:5μm粒径柱适合常规分析(柱效适中、背压适中);3μm或1.8μm亚2μm柱用于超高效液相(UHPLC),柱效更高但需配套高压泵(>400bar);大粒径(10μm+)用于制备柱。

柱长与内径:常规分析150×4.6mm;快速分析50×2.1mm(配UHPLC);微量样品分析选择小内径柱(2.1mm)以提高灵敏度。

二、色谱柱日常维护

平衡与老化:新柱首次使用前须用初始流动相冲洗至少30min;换用不相混溶的流动相时,须通过中间溶剂过渡(如从含盐水相换至有机相,须先用纯水冲洗去盐)。

保护柱的使用:在分析柱前安装保护柱(与分析柱固定相相同),可有效拦截样品中的颗粒和强保留杂质,延长分析柱使用寿命3–5倍。

冲洗与封存:每天分析结束后,用强溶剂(如100%甲醇或乙腈)冲洗色谱柱20–30min,去除残留强极性化合物;停用超过3天时,用纯有机相冲洗后封存,防止微生物生长和盐分结晶。

三、柱效监控

定期测定塔板数(N)、拖尾因子(T)和保留因子(k),建立色谱柱使用台账,当塔板数下降超过30%时应考虑更换色谱柱。我司备有多规格C18、C8液相色谱柱,欢迎致电 010-81101160 咨询选型。